Главное святилище обители есть древний собор Вознесения, усыпальница цариц и княгинь Московских, который заложен был в год кончины основательницей, великой княгиней Московской Евдокией, в инокинях Евфросинией, супругой Дмитрия Иоанновича Донского (1407), и обновлен Петром Великим в 1721 году. Храм сей есть как бы дополнение Архангельского собора и в нем продолжается царственная летопись усопших; но уже это не гробы сильных воителей и владык, возбуждавших страх или изумление, а только могильный отголосок их домашнего быта, пристанище таких жен, которые разделяли их семейные радости или горе и не редко возбуждали их на высокие подвиги: так иногда громкие звуки торжественной песни, переходя в более нежные тоны, дополняют и ими гармонию целого.
Зодчество храма напоминает собою здания, современные Троицкому собору Лавры. Богатыми окладами украшены почти все местные образа высокого иконостаса; драгоценный киот, с частицами святых мощей, устроенный усердием благочестивой царицы Ирины, висит на древней храмовой иконе Вознесения, которой венцы унизаны жемчугом и каменьями. У входа, близ южных дверей, почивает в заключенной раке, под богатым покровом, сама основательница обители, некогда Великая Княгиня Евдокия, а потом смиренная инокиня Евфросиния. Ее земная слава как супруги витязя Донского, увенчалась небесною славою христианских добродетелей, и тропарь, в честь ее воспеваемый, краткими словами выражает подвиг святой жизни:
«Княжения и царского чертога отлучилася, и чад твоих, Бога ради, оставила еси блаженная Евдокия; правостию умною, душу твою привязала еси любовь Христову, тленных и красных и временных забытием; притекла еси во обитель, тобою основанную, и с восприятием иноческого образа, преименовавшися Евфросиния, ангельски пожив, в трудах и постах подвизалася добре и к блаженному концу достигла еси; тем же молим тя, моли Христа Бога, спастися душам нашим».
Дочь князя Суздальского, который долго домогался Великого Княжества, брачным союзом с Димитрием навсегда утвердила за Москвою старейшинство между Князьями Русскими, и вместе со святым Алексием одушевляла его на великие подвиги.
Семнадцатью годами пережила она славного супруга и упрочила память Мамаевой битвы строением храмов во имя Рождества Богоматери, ибо в сей день сокрушены были татары мечом Донского. Годы не стерли свежести с лица Евдокии, некогда славившейся красотою, но сама она старалась укрыть широкою одеждою тело свое, изнуренное постами. Когда же некоторые из домашних, видя мнимую ее дородность, стали подозревать ее образ жизни, благочестивая княгиня принуждена была показать им свою власяницу и тяжкие вериги; все ужаснулись при виде ее истощения. Она не хотела окончить жизни среди почестей княжеских, и, отринув моление детей своих, постриглась в устроенной ею обители, не выходя из стен Кремля, основанного славным супругом. Многие исцеления ознаменовали святую ее кончину, перед глазами сына, Великого князя Василия, и митрополита Киприяна, который погребал Евдокию и освятил заложенную ею церковь.