Выявление вирусной РНК. Определение наличия в сыворотке РНК HCV необходимо для:
■ подтверждения инфекции HCV у анти–HCV–позитивных лиц или при подозрении на инфицирование при отсутствии антител к вирусу.
■ ранней диагностики острого гепатита.
■ контроля за перинатальной передачей вируса.
■ определения показаний к назначению противовирусной терапии.
■ контроля за эффективностью противовирусной терапии.
Наибольшее распространение получила PCR, заключающаяся в синтезе множества копий ДНК на основе вирусной РНК при помощи обратной транскриптазы с последующим электрофорезом в полиакриламидном геле. PCR может быть использована для обнаружения РНК как в сыворотке, так и в биоптатах печени. В последнее время получает распространение количественное определение РНК, для которого применяются такие методики, как анализ серийных разведений и амплификации разветвленной ДНК.
Необходимо отметить, что последний метод при наиболее точном определении степени виремии является менее чувствительным (около 70% чувствительности PCR) и, следовательно, требует параллельного ее проведения.
Реже используются другие методики, такие как лигазная цепная реакция и изотермическая амплификация нуклеиновых кислот.
Клинические особенности. Инкубационный период после заражения составляет от 5 до 7 нед, после чего наблюдаются повышение активности трансаминаз и другие клинические проявления.
Для острого гепатита С характерен высокий удельный вес безжелтушных форм (более 80%), протекающих чаще всего бессимптомно.
Клинические симптомы и лабораторные показатели гепатита С неотличимы от других вариантов острого гепатита. В целом острый гепатит С протекает значительно легче, чем другие острые вирусные гепатиты.
Диагноз. Специфическими маркерами, подтверждающими наличие острого гепатита С, являются антитела к вирусу гепатита С (anti–HCV), которые обнаруживаются в иммуноферментном анализе современными тест–системами, начиная со 2–3–й недели болезни. Для выявления ложноположительных образцов используют радиоиммуноблоттинг – анализ (RIBA), обеспечивающий правильный результат более чем в 95% случаев.
Единственным абсолютно надежным тестом является выявление РНК гепатита С с помощью полимеразной цепной реакции. Анализ на РНК HCV становится положительным не ранее чем через 2 нед после инфицирования.
Исследование РНК HCV может быть полезно в неясных случаях, хотя позитивный тест RIBA коррелирует с наличием РНК HCV. Использование PCR может быть показано при оценке активности вирусной репликации у тех лиц, у которых поражение печени может быть вызвано несколькими этиологическими факторами.