Слава Задонской обители особенно выросла после переселения сюда святителя Тихона, оставившего Воронежскую кафедру.
Святитель Тихон родился в 1724 г. в с. Короцко Новгородской губернии в семье бедного дьячка и был крещен под именем Тимофей. Окончив новгородскую семинарию, он остается там преподавать сначала греческий язык, а затем риторику и философию. В 34 года он принимает постриг с именем Тихон, а в 1759 г. переводится в Тверскую епархию, где становится архимандритом Успенского Желтикова монастыря. В 1762 г. он назначается викарным[73] епископом Кексгольмским и Ладожским, а через два года переводится на Воронежскую кафедру. Все свои силы он отдает нравственному очищению паствы, наставляя также и вверенное ему духовенство. Он рассылает послания священникам епархии о трезвом жительстве и духовном подвижничестве, пишет сочинение «Должность священническая о седьми святых тайнах».
Задонский Рождественно-Богородицкий мужской монастырь. Хромолитография XIX в.
В кафедральном соборе Воронежа перед воскресной литургией он вводит преподавание Закона Божия для просвещения народа. В это же время святитель пишет богословское сочинение о Священном Писании «Плоть и Дух». Напряженный труд подорвал здоровье архипастыря и в 1767 г. он уходит с кафедры, а через два года переселяется в отдаленный Задонский Богородицкий монастырь, где ведет строгую иноческую жизнь. Во многом способствуя благоустройству обители, он возводит богадельню, принимает людей для духовных наставлений, творит милостыни и продолжает много писать. В этот период среди его духовных сочинений следует отметить «Об истинном христианстве», «Сокровище духовное от мира собираемое», «Правила монашеского жития», а также многие другие творения о сущности истинного монашества. Скончался праведный Тихон 13 августа 1783 г. и был погребен под алтарем Владимирского собора.
В 1845–1853 гг. по проекту знаменитого архитектора К.А. Тона, автора храма Христа Спасителя в Москве, в обители возводится новый величественный пятиглавый собор во имя Владимирской иконы Божией Матери. При разборке старого храма в 1846 г. обнаруживается обвалившийся склеп святителя, в котором были обретены его нетленные мощи. Они были упокоены в теплом зимнем храме Рождества Богородицы, от которого происходит второе название монастыря. После окончания строительства нового Владимирского собора туда переносятся мощи святителя, которые совершали множество чудотворений, о которых неоднократно докладывалось Синоду и императору Николаю I. После тщательной проверки сообщений в 1861 г. состоялось прославление Тихона, причисление его к лику святых.