При инкубации лимфоцитов in vitro в определенных экспериментальных условиях с гетерологичными и собственными эритроцитами большая или меньшая популяция лимфоцитов связывает эритроциты, образуя структуры, названные «розетками». Метод розеткообразования используется для количественной оценки популяций Т– и В–лимфоцитов. Идеальными индикаторными частицами для Т–лимфоцитов человека являются эритроциты барана. У здоровых людей число Т–лимфоцитов, образующих розетки в периферической крови, достигает 52–53%.
Для идентификации В–лимфоцитов наиболее часто применяют эритроциты с нанесенными на них антителами и комплементом. Сенсибилизированные эритроциты присоединяются к лимфоциту благодаря наличию на них третьего компонента комплемента, который взаимодействует с рецептором дли третьего компонента комплемента, имеющимся только на поверхности В–лимфоцитов. У здоровых людей число В–лимфоцитов, образующих розетки в периферической крови, достигает 11–13%.
Реакция торможения миграции лейкоцитов. В результате непосредственного контакта с клетками–мишенями или с антигеном сенсибилизированные лимфоциты продуцируют ряд гуморальных субстанций – медиаторов клеточного иммунитета, необходимых для завершений иммунной реакции. Известно более 20 таких веществ и среди них фактор, угнетающий миграцию лейкоцитов (Leucocite inhibition factor – ЛИФ). Биологическая роль ЛИФ заключается в привлечении лейкоцитов в зону поступления антигена с последующей их активацией.
Действие ЛИФ выявляется с помощью реакции торможения миграции лейкоцитов (ТМЛ). Реакция ТМЛ наиболее часто выполняется по методу M.Soborg в модификации В.Я. Гергерта и М.К. Мажарова. Индекс миграции 80–120 принимают за норму.
В качестве антигенов для реакции ТМЛ используют гомогенат, ядерную, митохондриальную и микросомальную фракции аутологичной печени, а также сыворотки, содержащие антигены гепатита В. Реакция ТМЛ рекомендуется как чувствительный тест для изучения специфического клеточного иммунитета. Эта реакция наиболее доступна для обнаружения повышенной чувствительности замедленного типа к специфическим агентам.
Неодинаковую частоту выявления гиперчувствительности замедленного типа при патологии печени можно объяснить использованием различных антигенов печени. С гомогенатом ткани печени она составляет 38–50%, митохондриальной фракции – 50–66%. Наибольшее число положительных ответов отмечено со специфическим печеночным липопротеидом, выделенным при специальной очистке.
При исследовании реакции ТМЛ с поверхностным антигеном гепатита В показана важная роль сенсибилизации лимфоцитов к HBsAg.